Tunnettujen ATCC-kantojen säilyvyys kahdessa eri nestekuljetusputkessa

Abstract

Perinteisesti bakteriologisten näytteiden ottoon ja kuljetukseen on käytetty geelikuljetusputkia, jolloin näytteet täytyy viljellä manuaalisesti. Viljelyautomaation yleistyttyä on alettu käyttää viljelyautomaatteihin soveltuvia nestekuljetusputkia. Näyteastiassa (nestekuljetusputki ja geelikuljetusputki) tulee olla oikeat olosuhteet eri bakteereille ja mahdollisten taudinaiheuttajien tulee säilyä hengissä sekä rikastumatta säilytyksen ja kuljetuksen ajan, jotta näytteen laatu pysyisi luotettavana.

Opinnäytetyössä tutkittiin tunnettujen American Type Culture Collection (ATCC) -bakteerikantojen säilyvyyttä eSwab®- sekä Puritan Liquid Amies Transport system (PLAT®) -nestekuljetusputkissa. Opinnäytetyöhön valittiin kasvu- ja säilytysvaatimuksiltaan eroavia aerobisia sekä anaerobisia kokki- ja sauvabakteereita. Opinnäytetyö suoritettiin HUSLABin kliinisen bakteriologian osastolla. Bakteerien säilyvyyttä tutkittiin 0, 6, 24, 48 sekä 72 tunnin kuluttua kuvitellusta näytteenottohetkestä sekä huoneenlämmössä että jääkaappilämpötilassa säilytettyinä. Näytteet viljeltiin maljoille eri aikapisteissä ja bakteeripesäkkeet laskettiin 18–48 tunnin kuluttua viljelystä.

Opinnäytetyön tulosten perusteella voidaan todeta käytettyjen ATCC-kantojen säilyvän tutkimuskelpoisina eSwab®-nestekuljetusputkessa 48 tunnin säilytyksen ajan, mikäli putki on säilytetty jääkaappilämpötilassa. PLAT®-nestekuljetusputkessa säilytettynä käytetyt ATCC-kannat säilyivät jääkaappilämpötilassa 48 tunnin säilytyksen ajan, poikkeuksena Prevotella melaninogenica sekä Haemophilus influenzae, joiden säilyvyys oli näillä kannoilla huonompi. Tulosten perusteella ei suositella nestekuljetusputkien säilytystä huoneenlämpötilassa, mikäli säilytysaika on yli 6 tuntia. Jääkaappilämpötilassa säilytettynä bakteerien määrä näytteessä kuvaa lähtötasoa (näytteenottohetkeä) jopa 72 tunnin säilytyksen ajan (poikkeuksena N. gonorrhoeae, H. influenzae). Jotta kaikki mahdolliset patogeeniset löydökset kuitenkin saataisiin kiinni, olisi näytteet viljeltävä viimeistään 48 tunnin kuluttua.

The traditional way to collect bacteriological samples is to use gel transports tubes that are cultured manually. Automated inoculation instrument becoming general the use of liquid amino transport tubes is now more common. The transport tube has to have right condi-tions for different bacteria, possible pathogens has to stay viability through the storage and transport.

The purpose of our final project was to find out the survival of American Type Culture Collection (ATCC)-samples in liquid amino transport tubes. For the final project were used aerobic and anaerobic gram-positive and gram-negative bacteria. We discovered preservation in two different liquid amino transport tube: eSwab® and Puritan Liquid Amino Transport System (PLAT®)-Liquid amies transport tubes. Final project was done in a co-operation with HUSLAB, the division of clinical microbiology, Helsinki, Finland. Samples were cul-tured to maintenance medium after 0, 6, 24, 48 and 72 hours. The colony formit units were calculated after 18-48 from the culture. The specimens were stored both at the room temperature and refrigerator temperature.

In our final project we detected that the used ATCC-samples survived 48 hours in eSwab®- tube if they were storaged in refrigerator temperature. ATCC-samples survived 48 hours in PLAT®-tube if they were storaged in refrigerator temperature, exception Prevotella melaninogenca and Haemophilus influenzae which did not survive that well. Based on our study we do not recommend storage at room temperature if the storage time is more than 6 hours. Storage in refrigerator temperature is generally recommendable.