3D-soluviljelmien optimointi mikrofluidistiselle sirulle
Rouvinen, Seidi (2024)
2024
All rights reserved. This publication is copyrighted. You may download, display and print it for Your own personal use. Commercial use is prohibited.
Julkaisun pysyvä osoite on
https://urn.fi/URN:NBN:fi:amk-2024052615763
https://urn.fi/URN:NBN:fi:amk-2024052615763
Tiivistelmä
Tämä opinnäytetyö toteutettiin Puissan Biotechin laboratorion tiloissa Viikissä. Tarkoituksena oli kasvattaa eri solulinjoilla 3D-viljelmiä ja optimoida, mitkä menetelmät sopivat parhaiten sferoidien muodostukseen. Solulinjat olivat munasarjasyöpä, -fibroblasti- ja endoteelisolut. Näitä soluviljelmiä tullaan käyttämään mikrofluidistisilla Organ-on-chip-siruilla. Sirut ovat Puissan Biotechin suunnittelemia ja mallintamia.
Soluja kasvatettiin ensin 2D-viljelminä, joista siirryttiin kasvattamaan soluja 3D-viljelminä kuoppalevyillä, hanging drop -menetelmällä, fibrinogeeni-trombiini-geelimatriksissa sekä GrowDex® -geelillä. Munasarjasyöpäsoluille parhaimmaksi osoittautui hanging drop -menetelmä. Fibroblastisoluille mikään testatuista menetelmistä ei ollut sopiva sferoidien muodostukseen. Endoteelisoluilla lähimmäksi sferoidia päästiin hanging drop -menetelmällä.
Munasarjasyöpäsolujen 2D-soluviljelmiä siirrostettiin sirun sisälle ja inkuboitiin yön yli. Tämän jälkeen solut kiinnitettiin ja värjättiin sirun sisällä. Siru kuvattiin Helsingin yliopiston LMU-yksikössä konfokaalimikroskoopilla. Valon siroamisen takia sirun sisälle ei kuitenkaan nähty. Sirua kehitellään jatkossa eri materiaaleilla niin, että sisälle näkee ilman valon siroamista.
Soluja kasvatettiin ensin 2D-viljelminä, joista siirryttiin kasvattamaan soluja 3D-viljelminä kuoppalevyillä, hanging drop -menetelmällä, fibrinogeeni-trombiini-geelimatriksissa sekä GrowDex® -geelillä. Munasarjasyöpäsoluille parhaimmaksi osoittautui hanging drop -menetelmä. Fibroblastisoluille mikään testatuista menetelmistä ei ollut sopiva sferoidien muodostukseen. Endoteelisoluilla lähimmäksi sferoidia päästiin hanging drop -menetelmällä.
Munasarjasyöpäsolujen 2D-soluviljelmiä siirrostettiin sirun sisälle ja inkuboitiin yön yli. Tämän jälkeen solut kiinnitettiin ja värjättiin sirun sisällä. Siru kuvattiin Helsingin yliopiston LMU-yksikössä konfokaalimikroskoopilla. Valon siroamisen takia sirun sisälle ei kuitenkaan nähty. Sirua kehitellään jatkossa eri materiaaleilla niin, että sisälle näkee ilman valon siroamista.