Cut-off-tason määrittäminen tietyille kvantitoitaville yhdisteille dopinganalytiikassa LC-MS/MS- ja LC-Q-TOF-MS-menetelmillä
Marin, Miia (2024)
2024
All rights reserved. This publication is copyrighted. You may download, display and print it for Your own personal use. Commercial use is prohibited.
Julkaisun pysyvä osoite on
https://urn.fi/URN:NBN:fi:amk-2024112831032
https://urn.fi/URN:NBN:fi:amk-2024112831032
Tiivistelmä
Tämä opinnäytetyö tehtiin Terveyden ja hyvinvoinnin laitoksen dopingtestauslaboratoriolle. Työn tarkoituksena oli määrittää cut-off-tasot tietyille kvantitoitaville yhdisteille. Yhdisteet olivat efedriini, pseudoefedriini, metyyliefedriini, norpseudoefedriini, morfiini, prednisoni, flutikasonipropionaatti 17b-karboksyylihappo ja 4-kloorifenoksietikkahappo.
Dopinganalytiikassa näytteistä tehdään ensiksi seulonta-analyysit, joiden avulla suuresta näytemäärästä erotetaan mahdollisesti positiiviset näytteet. Jos näyte osoittautuu seulonnassa positiiviseksi, siitä tehdään vielä varmistusanalyysi. Varmistusanalyysin avulla varmistetaan positiivinen tulos. Tietyille yhdisteille voidaan kuitenkin määrittää seulontamenetelmään cut-off-taso, jonka alle jäävistä pitoisuuksista ei tarvitse tehdä varmistusanalyysiä, vaan tulos on suoraan negatiivinen.
Työn toteutuksessa näytteet valmistettiin yhdisteiden threshold- ja MRL-tasoille sekä käsiteltiin seulonta- ja varmistusmenetelmillä. Menetelmät sisälsivät laimentamista, hydrolyyseja, SPE-uuttoja sekä neste-nesteuuttoja. Esikäsittelyjen jälkeen näytteet analysoitiin LC-MS/MS- ja LC-Q-TOF-MS-laitteistoilla.
Cut-off-tasot saatiin määritettyä onnistuneesti jokaiselle yhdisteelle. Efedriinille cut-off-tasoksi saatiin 5,0 µg/ml, pseudoefedriinille 75,0 µg/ml, metyyliefedriinille 5,0 µg/ml, norpseudoefedriinille 2,5 µg/ml, morfiinille 500,0 ng/ml, prednisonille 200,0 ng/ml, fluti-kasonipropionaatti 17b-karboksyylihapolle 10,0 ng/ml ja 4-kloorifenoksietikkahapolle 3,0 µg/ml.
THL:n dopingtestauslaboratorio ottaa tulokset käyttöönsä. Jatkossa näytteiden analysointi on hieman nopeampaa, koska varmistusanalyysiä ei tarvitse tehdä seulontatuloksen ollessa cut-off-tason alapuolella.
Dopinganalytiikassa näytteistä tehdään ensiksi seulonta-analyysit, joiden avulla suuresta näytemäärästä erotetaan mahdollisesti positiiviset näytteet. Jos näyte osoittautuu seulonnassa positiiviseksi, siitä tehdään vielä varmistusanalyysi. Varmistusanalyysin avulla varmistetaan positiivinen tulos. Tietyille yhdisteille voidaan kuitenkin määrittää seulontamenetelmään cut-off-taso, jonka alle jäävistä pitoisuuksista ei tarvitse tehdä varmistusanalyysiä, vaan tulos on suoraan negatiivinen.
Työn toteutuksessa näytteet valmistettiin yhdisteiden threshold- ja MRL-tasoille sekä käsiteltiin seulonta- ja varmistusmenetelmillä. Menetelmät sisälsivät laimentamista, hydrolyyseja, SPE-uuttoja sekä neste-nesteuuttoja. Esikäsittelyjen jälkeen näytteet analysoitiin LC-MS/MS- ja LC-Q-TOF-MS-laitteistoilla.
Cut-off-tasot saatiin määritettyä onnistuneesti jokaiselle yhdisteelle. Efedriinille cut-off-tasoksi saatiin 5,0 µg/ml, pseudoefedriinille 75,0 µg/ml, metyyliefedriinille 5,0 µg/ml, norpseudoefedriinille 2,5 µg/ml, morfiinille 500,0 ng/ml, prednisonille 200,0 ng/ml, fluti-kasonipropionaatti 17b-karboksyylihapolle 10,0 ng/ml ja 4-kloorifenoksietikkahapolle 3,0 µg/ml.
THL:n dopingtestauslaboratorio ottaa tulokset käyttöönsä. Jatkossa näytteiden analysointi on hieman nopeampaa, koska varmistusanalyysiä ei tarvitse tehdä seulontatuloksen ollessa cut-off-tason alapuolella.