Kampylobakteerien esiintyvyys maitotiloilla, C.jejunin biofilminmuodostus sekä MALDI-TOF-menetelmän validointi kampylobakteerien lajitunnistukseen

Abstract

Kampylobakteerit ovat yleisin ihmiselle suolistoinfektioita aiheuttava bakteeri maailmanlaajuisesti. Kampylobakteerit ovat yksi merkittävistä raakamaidon välityksellä leviävistä taudinaiheuttajabakteereista ja kampylobakteereiden aiheuttamia raakamaitoepidemioita on raportoitu Suomessa ja maailmalla useita. Kampylobakteereita esiintyy usein nautojen suolistomikrobifloorassa, mutta ne eivät aiheuta aikuisille eläimille sairautta.

Työn tarkoituksena oli seurata kampylobakteerien esiintymistä naudoissa ja raakamaidossa kolmella eri raakamaitoa myyvällä maitotilalla, joiden nautakarjassa oli aikaisemmin todettu kampylobakteeria. Tutkittiin myös aiemmin raakamaidon välityksellä epidemian aiheuttaneen Campylobacter jejuni -kannan kykyä tuottaa biofilmiä lasi- ja teräspinnalle, sekä validoitiin MALDI-TOF-menetelmä korvaamaan kampylobakteerien lajitunnistuksessa käytetyt biokemialliset testit.

Seurantajakson aikana (kolme kuukautta) kaikilta maitotiloilta eristettiin ulosteista kampylobakteereita. Maidosta tai suodattimista kampylobakteereita ei löydetty. Yhdestä ympäristönäytteestä eristettiin kampylobakteeria. Biofilmikokeissa saatiin alustavia tuloksia siitä, että tutkimallamme C. jejuni -kannalla on kyky tuottaa biofilmiä ainakin lasipinnalle mikroaerobisesti. MALDI-TOF-menetelmän validointi onnistui ja menetelmä hyväksyttiin akkreditoinnin piiriin.

Tulosten perusteella näyttäisi siltä, että tutkittujen maitotilojen nautakarjan suoliston mikrobifloorassa on edelleen kampylobakteeria. Ulosteiden ja sitä kautta kampylobakteerien pääsy maitoon ja laitteistoon on kuitenkin pystytty estämään kaikilla maitotiloilla.

Campylobacter spp. is the most common bacteria worldwide causing gastroenteric infec-tions in humans. Campylobacteria are one of the significant pathogenic bacteria in raw milk and there have been several reports of raw milk outbreaks caused by campylobacteria in Finland and worldwide. Campylobacteria are often present in bovine intestinal tract, although it does not cause clinical disease in adult animals.

The aim of the thesis was to monitor the occurrence of campylobacteria in cattle and raw milk on three different dairy farms. Each farm had been reported to have campylobacteria in their cattle in previous studies. It was also examined whether a Campylobacter jejuni strain, which had previously caused an outbreak via raw milk, had an ability to produce biofilm in glass and steel surfaces, and lastly the MALDI-TOF application was validated to replace biochemical tests used in identifying campylobacteria strains.

During the monitoring period (three months) campylobacteria was isolated from all dairy farms from bovine fecal samples. Campylobacteria were not found in milk or filter samples. Campylobacteria was isolated from one environmental sample taken from a drinking trough. Results of biofilm tests suggest that C. jejuni has an ability to develop biofilm at least on a glass surface in microaerobic conditions. The validation of the MALDI-TOF method succeeded and the procedure was accepted to the domain of accreditation.

Results suggest that every dairy farm still has campylobacteria in the bovine intestinal mi-croflora. Campylobacter contamination of milk and milking equipments has, however, been successfully prevented on all three dairy farms.